很多超凈工作臺的用戶經(jīng)常都會提到的一個問題是為什么我們在做抑菌實驗中會出現(xiàn)超凈工作臺被污染,我們要如何防止這類污染呢?以下是我們客戶超凈工作臺使用過程中提出的問題進(jìn)行解答。
很多用戶提出的問題如下:
1、我覺得我已經(jīng)特別注意滅菌了,可在超凈工作臺做抑菌實驗總污染時還是每次都污染。
2、我用PDA培養(yǎng)基做抑制真菌的實驗,每次都有細(xì)菌長出來?是不是在超凈工作臺做抑菌實驗總污染情況。
3、現(xiàn)在做一次需要的時間精力可多了,還每次都失敗,我都快崩潰了,哪位高人給指點一下關(guān)于在超凈工作臺做抑菌實驗總污染怎么辦?
4、那個超凈臺有很多人用過,基本每個人一開始都會污染,但是做幾次之后總有一次不污染的??墒俏叶甲隽薔次了還是污染。
5、我很注意無菌操作的,要不然各位能不能列一下無菌操作的要點?
關(guān)于以上超凈工作臺如何防止污染問題解答如下:
1、所有操作必須在酒精燈火焰周圍5厘米內(nèi)完成(一開始我被燙傷無數(shù)次)
2、所有器皿的開口同樣不得離開酒精燈火焰5厘米,開口要盡量的小,但接種環(huán)不得碰到容器外壁.如果是用接種環(huán)做實驗,那么最好先找點酒精,進(jìn)行每步操作之前都把接種環(huán)蘸點酒精然后在火上燒
3、另外接種環(huán)鐵絲和主體連接的那個地方一定要燒干凈,那里是最容易染菌的地方,用完的酒精可以倒到酒精燈里做燃料,這樣就不怕浪費了(如果你做的是病原菌就免了,小命要緊)
4、平板倒好以后不要拿下蓋子,直接摞成一疊讓它凝固,這樣中間的平板沒有水汽(可見我們實驗室的超凈臺污染到了什么地步)
5、超凈工作臺用之前開紫外消毒半小時,這招對真菌效果不大,但對細(xì)菌還是蠻有用的
6、不知道你的污染菌落是細(xì)菌還是酵母,但如果是細(xì)菌的話,可以看看能不能往培養(yǎng)基里放抗生素。
7、當(dāng)初我是一周以后才不污染的,是你一個人的問題還是別人也有污染?如果是你一個人的問題,那就是無菌操作的技術(shù)不過關(guān);如果是大家都有這個問題,那就是超凈工作臺的問題。你說的大部分注意要點我基本都已經(jīng)做到了,就差往培養(yǎng)基里加抗生素了。
從網(wǎng)上也摘錄了部分回答:
可不可以麻煩你把這個問題說得更細(xì)致一點?
比如什么時候加抗生素,加多少,加哪一種?我要培養(yǎng)的是灰霉菌,我感覺長出的應(yīng)該是細(xì)菌。另外,用PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)灰霉菌,ph值有什么要求?
是在培養(yǎng)基滅菌后再加抗生素嗎?
還是連抗生素一起進(jìn)滅菌鍋要看你長出來的是什么細(xì)菌。。。
我用的最多的抗生素是氨芐,100毫升加36微升……建議你把氨芐和鏈霉素混加,應(yīng)該能抑制大部分細(xì)菌……PDA培養(yǎng)灰霉應(yīng)該沒太多PH要求吧,實在需要的話把PH調(diào)到5……將移液槍的槍頭裝一盒去滅菌,然后把移液槍,槍頭放到超凈工作臺里,紫外消毒半小時。將培養(yǎng)基加熱溶化,放在超凈里冷卻到約45度,放入抗生素,搖勻,然后倒平板。
其實不同行業(yè)所使用的超凈工作臺種類都是有很大區(qū)別,如何做到防止污染的方法顯然不止一種,主要還需要用戶都去觀察了解。
